技术主题/Technology Feature

暴马丁香ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选  

杨晓霞 , 郑健 , 冷平生 , 王羽 , 王宇婷
北京农学院园林学院, 北京, 102206
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12卷, 第 25 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.001018
收稿日期: 2014年04月28日    接受日期: 2014年07月02日    发表日期: 2014年08月03日
© 2014 BioPublisher 生命科学中文期刊出版平台

这是一篇《分子植物育种》印刷版的数字优先出版(Online Publishing in Advance)论文,如果需要下载阅读全文,请您订阅。

推荐引用:
Yang X.X., Zheng J., Leng P.S., Wang Y., and Wang Y.T., 2014, Optimization of ISSR-PCR System and Selection of Primers for Syringa reticulata var. amurensis, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(5): 1018-1026 (杨晓霞, 郑健, 冷平生, 王羽, 王宇婷, 2014, 暴马丁香ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选, 分子植物育种, 12(5): 1018-1026)
摘 要

为建立暴马丁香ISSR-PCR最佳反应体系,本研究以暴马丁香基因组DNA为模板,首先通过单因子试验设计筛选出各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验,对暴马丁香ISSR-PCR反应有影响的模板DNA、dNTPs、Mg2+Taq DNA聚合酶和引物浓度等5种因素4个水平进行了优化试验。暴马丁香的ISSR-PCR最佳反应体系最终确定为:在25 μL的反应体系中,DNA模板是40 ng,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,引物浓度为0.4 μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为1.5 U,dNTPs浓度为0.2 mmol/L。利用该体系从60条ISSR引物中筛选出了扩增条带清晰、多态性好的10条引物。这一体系的建立及多态性引物的筛选为以后利用ISSR分子标记技术进行暴马丁香的有关研究提供了科学依据。

关键词
暴马丁香;ISSR-PCR;单因子试验;正交设计;引物筛选
[全文 PDF]
《分子植物育种》印刷版
• 第 12 卷
阅览选项
. PDF(0KB)
. 全文 HTML
读者评论
. 评论
作者的其他论文
.
杨晓霞
.
郑健
.
冷平生
.
王羽
.
王宇婷
相关论文
.
暴马丁香
.
ISSR-PCR
.
单因子试验
.
正交设计
.
引物筛选
服务
. Email 推荐给朋友
. 发表评论